引言
淋巴瘤的診斷與次分類在過去三十年間有了戲劇性的轉變。在此之前，普遍採用的分類系統純粹以腫瘤性淋巴球的形態學特徵為基礎。然而，現代分類系統還會運用所有可取得的免疫表型 (immunophenotypic)、基因 (genetic) 與臨床資訊，將病例歸類在一起，以利治療與預後判斷。因此，免疫組織化學 (immunohistochemical) 與分子技術構成了診斷流程中不可或缺的一環，並常規應用於可疑的皮膚淋巴增生性病變 (cutaneous lymphoproliferations) 評估，以鑑別反應性 (reactive) 與腫瘤性 (neoplastic) 病程，並在後者確認後加以次分類。如今執業的病理醫師已可運用一整套抗體與分子技術。
次世代定序 (Next-Generation Sequencing) 於癌症的應用
對於癌症，NGS 能夠在任意數量的基因中偵測突變 (mutations)、缺失 (deletions)、插入 (insertions) 與複本數變異 (copy number alterations)。此方法在皮膚病理學中的主要臨床應用一直是黑色素瘤 (melanoma)（圖 2.31）。更具體的黑色素瘤應用將在第 26 章詳述。在增加所探查的基因數量，與隨之升高的成本及複雜度之間，必須維持平衡。透過 DNA 定序可獲得部分關於融合基因 (fusion genes) 偵測的資訊，但 RNA 方法是較佳的選擇，因為其敏感度更高且更為穩健。NGS 目前是廣泛探查循環 (腫瘤) DNA（亦稱液態切片，liquid biopsies）的首選定序方法，這類檢體在某些情況下未來或可取代、或可補充以腫瘤組織為基礎的診斷。RNA 定序也可用於測定基因表現，類似於其他雜交 (hybridization) 與定量定序方法。若有需要，亦可偵測微小 RNA (micro-noncoding RNA) 與長鏈非編碼 RNA (long-noncoding RNA)。此技術可達極高敏感度，使得 RNA 定序甚至能自單一細胞進行，但目前尚無針對此方法的特定臨床應用。NGS 也徹底改變了我們探查胚系 (germ line) DNA 中與疾病相關的變異或突變之能力。這些以 NGS 為基礎、針對癌症與遺傳性疾病的方法，正在臨床上日益普及；隨著 NGS 成本快速下降，以及解讀用生物資訊演算法之可靠度提升，其臨床應用 [原文於此中斷]。
本節範圍
本節專門聚焦於聚合酶連鎖反應 (polymerase chain reaction, PCR) 在診斷性血液病理學 (diagnostic hematopathology) 的應用——這是目前最常使用的分子技術——用於偵測抗原受體基因重組 (antigen receptor gene rearrangement)。特定淋巴瘤次型相關的免疫表型與基因特徵詳見第 29 章。此外，以 FISH 為基礎的技術也可用於顯示主要與 B 細胞淋巴瘤 (B-cell lymphomas) 相關的轉位 (translocation)。
圖 2-31：整合式基因體檢視器 (integrated genome viewer, IGV) 顯示黑色素瘤中的 BRAF V600E 突變。請注意，此顯示呈現由 NGS 定序在雙向（正股與反股，分別以藍色與紅色表示）所定序的個別 DNA 股。因此可精確判定變異等位基因頻率 (variant allele frequency)。