引言
- 電子顯微鏡 (electron microscopy) 的使用已遠不如以往普遍。在免疫組織化學 (immunohistochemical) 方法可作為合理替代的情況下，較偏好採用免疫組織化學。
原理與檢體處理
- 穿透式電子顯微鏡 (transmission electron microscopy) 提供的解析度遠優於光學顯微鏡 (light microscopy)。為使解析度最佳化，組織必須包埋於極為堅硬的材料中，以利進行 80 nm 的超薄切片 (ultrathin sectioning)。
- 多數情況下偏好使用疏水性環氧樹脂 (hydrophobic epoxy resins)。
- 當檢體需要進行超微結構 (ultrastructural) 檢查時，欲檢查的部分必須立即以適當的固定液 (fixative) 處理。固定液的體積應為樣本大小的 10 倍 (10 times the sample size)。最終檢體需切成 1 mm 大小的方塊 (cubed to 1 mm portions)。
- 固定 (fixation) 會受下列因素影響：
- pH
- 滲透壓 (osmolarity)
- 緩衝液的離子組成 (ionic composition of buffer)
- 固定液濃度 (fixative concentration)
- 溫度 (temperature)
- 固定的時間長度 (duration of fixation)
- 標準程序為：以醛類 (aldehyde)（通常為 glutaraldehyde）進行初級固定 (primary fixation)，並以 osmium tetroxide 進行次級固定 (secondary fixation)。
診斷應用
- 免疫組織化學的進展已降低了對電子顯微鏡進行細胞譜系 (cell lineage) 超微結構確認的依賴。儘管如此，皮膚科超微結構研究在下列疾病的診斷上仍屬重要：
- 未分化腫瘤 (undifferentiated tumors)
- 免疫性水疱病 (immunobullous disease)
- 伴皮質下梗塞與白質腦病變之大腦體染色體顯性動脈病變 (cerebral autosomal dominant arteriopathy with subcortical infarcts and leukoencephalopathy, CADASIL)
- 類澱粉沉積症 (amyloidosis)
- 代謝性儲積疾病 (metabolic storage diseases)
- 細胞間連接 (intercellular junctions)、Weibel-Palade bodies、黑色素小體 (melanosomes) 與前黑色素小體 (premelanosomes) 分別有助於癌 (carcinomas)、內皮腫瘤 (endothelial tumors) 與黑色素細胞腫瘤 (melanocytic tumors) 的診斷。
- 在 CADASIL 中，血管平滑肌細胞 (vascular smooth muscle cells) 的凹陷處可見細胞外、電子緻密 (electron-dense) 的顆粒狀物質。
- 類澱粉 (amyloid) 可被辨識為隨機排列、細胞外、不分支 (nonbranching) 的纖維 (fibrils)，其長度不定、直徑為 7–10 nm。
- 穿透式電子顯微鏡在正常與病理性人體細胞及組織成分、以及感染性病原體 (infective agents) 結構的持續評估上，仍是一項有價值的工具。
- 技術的進步已使超微結構影像得以電子化擷取 (electronic capture)（圖 2.14）。
圖 2-14:具電子影像擷取功能的穿透式電子顯微鏡（箭頭, arrow）與電子影像擷取裝置（箭頭頭, arrowhead）。(Transmission electron microscope with electronic image capture)