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原理與標記物
- 免疫螢光 (immunofluorescence, IMF) 可在亞細胞層級界定抗原-抗體交互作用；此交互作用需將一個易辨識的 label 不可逆地結合上去。
- 標記物為螢光染料 (fluorochrome)，如 rhodamine 或 fluorescein，能以紫外光或可見光形式吸收輻射。
- 用途涵蓋多種具皮膚病理重要性的組織抗原，包括感染性與自體免疫水疱性疾病的診斷。
直接 vs 間接技術
- 直接 IMF：抗體直接與 fluorochrome 結合 (conjugated)，於紫外光顯微鏡下偵測組織切片中的抗原。
- 間接 IMF：病人血清（含抗體）先與含抗原的組織切片作用，之後再加上與 fluorochrome 結合的抗人類免疫球蛋白抗體。
- 成功顯示抗原的前提：抗原須在原位 (in situ) 維持足夠不可溶性。
檢體運送
- 直接 IMF 之皮膚切片可以新鮮狀態運送：浸生理食鹽水紗布、置於冰上容器；或用運送介質如 Michel medium。
- 運送介質須維持 pH 7.0–7.2。
臨床應用與優點
- 主要用途：解讀自體免疫水疱性疾病、紅斑性狼瘡 (lupus erythematosus)、血管炎 (vasculitis)。
- 相較免疫組織化學 (immunohistochemistry) 的優點：
- 對抗原偵測更敏感。
- 可用特殊固定法保存「困難的」抗原；切片褪色 (fading) 可用抗褪色封片劑 (anti-fading mountants) 克服。